溫度分布驗(yàn)證的8個(gè)步驟
定期對環(huán)境試驗(yàn)箱內(nèi)的條件進(jìn)行分布試驗(yàn)，如對溫度和濕度等進(jìn)行驗(yàn)證是必須的，這對于符合FDA（美國食品藥品監(jiān)督管理局）的監(jiān)管要求非常關(guān)鍵[1~5]。本應(yīng)用指南提供了一些方法，有助于驗(yàn)證項(xiàng)目符合《現(xiàn)行藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（cGMP）的要求，本應(yīng)用指南中所說的探頭、傳感器、數(shù)據(jù)記錄儀是可互換的，大多數(shù)建議的基礎(chǔ)是使用數(shù)據(jù)記錄儀作為傳感設(shè)備。
第1步——編寫驗(yàn)證計(jì)劃
先，書面定義驗(yàn)證目標(biāo)，創(chuàng)建一個(gè)所用方法的概要，并列出任何預(yù)計(jì)的障礙。在大多數(shù)情況下，這3項(xiàng)構(gòu)成了驗(yàn)證方案的主要內(nèi)容，下面幾個(gè)注意點(diǎn)*好以書面形式編入驗(yàn)證計(jì)劃。
必須符合的法規(guī)與要求
先審核設(shè)施質(zhì)量指南中所列內(nèi)容（如：CFR 210、211等），并查找*近的修改或更新。盡管許多監(jiān)管機(jī)構(gòu)要求提供受控空間的溫度分布試驗(yàn)結(jié)果，但并沒有規(guī)定任何具體方法，因此需要我們編制文件以說明合理的分布試驗(yàn)流程。
要求監(jiān)測的數(shù)據(jù)點(diǎn)
數(shù)據(jù)點(diǎn)的數(shù)量受多種因素影響而不同，這些因素包括環(huán)境、溫度/相對濕度范圍和具體應(yīng)用。小型試驗(yàn)箱的分布試驗(yàn)所需的典型數(shù)量包括：
九（9）：在大多數(shù)情況下，這是試驗(yàn)箱內(nèi)采樣點(diǎn)數(shù)量的*低限度（除了非常小的試驗(yàn)臺(tái)應(yīng)用）。具體包括兩層，每層4臺(tái)記錄儀放置于每個(gè)角，中央1臺(tái)。
或者，十五（15）：三層，4臺(tái)記錄儀放置于每個(gè)角，三層中央各1臺(tái)。
或者，每層擱板上4臺(tái)或5臺(tái)記錄儀。
每臺(tái)數(shù)據(jù)記錄儀擺放的位置
建議放置記錄儀時(shí)以網(wǎng)格狀均勻分布，同時(shí)監(jiān)測試驗(yàn)箱內(nèi)因熱損耗和/或空氣流動(dòng)而導(dǎo)致的*差位置也是很重要的。監(jiān)測試驗(yàn)箱各個(gè)角落和任何開口/通道附近將覆蓋大部分的*差位置，但是，在試驗(yàn)箱內(nèi)架設(shè)擱板可能要求確認(rèn)額外的*差位置。將傳感器放置在溫控裝置的控制傳感器，或試驗(yàn)箱內(nèi)任何報(bào)警傳感器的位置或附近。
試驗(yàn)箱負(fù)荷
分布試驗(yàn)是在空箱時(shí)進(jìn)行（為了運(yùn)行確認(rèn)-OQ），還是在試驗(yàn)箱裝滿產(chǎn)品時(shí)進(jìn)行（為了性能確認(rèn)- PQ）？對于大多數(shù)制藥或生物技術(shù)應(yīng)用來講，兩項(xiàng)測試都很重要。 要考慮到運(yùn)行確認(rèn)和性能確認(rèn)對過程的影響。并且，有些監(jiān)管機(jī)構(gòu)[2] 要求在驗(yàn)證過程中使用*大和*小負(fù)荷?？障淇梢员徽J(rèn)為是*小負(fù)荷，也通常是箱內(nèi)溫度波動(dòng)*壞的情況。
跟蹤試驗(yàn)箱內(nèi)空氣溫度
跟蹤試驗(yàn)箱內(nèi)產(chǎn)品的溫度，如溶液瓶中的溫度，有時(shí)被認(rèn)為更重要，原因是它使數(shù)據(jù)不容易受到門定期打開和關(guān)閉等輕微干擾的影響。
測量的參數(shù)
如果計(jì)劃存儲(chǔ)對濕度敏感的產(chǎn)品，那么試驗(yàn)箱除了溫度還要做相對濕度的分布試驗(yàn)。
提取讀數(shù)的頻率
典型的采樣頻率是每分鐘1次，或者5分鐘1次。但是，如同驗(yàn)證的大多數(shù)其他方面，要準(zhǔn)備論證采樣頻率，并把合理說明包括在計(jì)劃和/或方案中。
分布試驗(yàn)的時(shí)間
試驗(yàn)時(shí)間各不相同，可能須提供理由。典型的試驗(yàn)時(shí)間長度為24、48或72h，也偶爾有設(shè)施的分布試驗(yàn)時(shí)間需要1周、1個(gè)月甚更長。對于實(shí)驗(yàn)室規(guī)模的試驗(yàn)箱和步入式試驗(yàn)箱，24~72h就足夠了。但是，對于內(nèi)部溫度受外部溫度影響的較大規(guī)模項(xiàng)目（如溫控倉庫），可能需要較長的試驗(yàn)時(shí)間。較大型的試驗(yàn)箱可能還需要在夏季和冬季進(jìn)行試驗(yàn)，根據(jù)設(shè)施所在地的季節(jié)溫度變化情況而定。
持續(xù)時(shí)間
提前制定測試時(shí)間表可使驗(yàn)證技術(shù)人員放置好所有數(shù)據(jù)記錄儀，從而能夠同時(shí)開始和停止數(shù)據(jù)采集。

重復(fù)測試的時(shí)間
盡管有些行業(yè)只需要進(jìn)行初步確認(rèn)，但有些就要求定期重復(fù)進(jìn)行溫度分布試驗(yàn)。再一次對任何適用的規(guī)范進(jìn)行審核，并確保在驗(yàn)證計(jì)劃/方案中記錄下預(yù)定的測試頻率。一般來講，盡管初步確認(rèn)包括空載試驗(yàn)箱和滿負(fù)荷試驗(yàn)箱的分布試驗(yàn)，但隨后的重復(fù)確認(rèn)僅要求滿負(fù)荷試驗(yàn)箱的分布試驗(yàn)。
其他類型的測試
大多數(shù)情況下，監(jiān)管機(jī)構(gòu)只需要驗(yàn)證空載試驗(yàn)箱和滿負(fù)荷試驗(yàn)箱。但是，其它類型的測試可能會(huì)提供有價(jià)值的信息?？赡軐ζ髽I(yè)有用的兩種常見測試為：
溫度恢復(fù)試驗(yàn)：此項(xiàng)試驗(yàn)使用與分布試驗(yàn)時(shí)同樣位置的相同探頭數(shù)量，測量時(shí)間間隔為15~30s。在試驗(yàn)箱溫度保持穩(wěn)定和數(shù)據(jù)記錄儀記錄數(shù)據(jù)時(shí)，試驗(yàn)箱門打開，打開時(shí)間通常是試驗(yàn)箱的正常運(yùn)行時(shí)間（可從實(shí)驗(yàn)室規(guī)模試驗(yàn)箱的1min，到集貨區(qū)/收貨區(qū)使用的大型步入式試驗(yàn)箱的5min），然后關(guān)閉。數(shù)據(jù)采集持續(xù)到試驗(yàn)箱恢復(fù)到指定的工作范圍時(shí)為止。這一測試表明，在試驗(yàn)箱正常運(yùn)行期間，產(chǎn)品溫度沒有受到不佳影響。
絕緣導(dǎo)熱系數(shù)/溫度變化試驗(yàn)：此項(xiàng)試驗(yàn)也采用與分布試驗(yàn)相同的設(shè)置和測量時(shí)間間隔。在試驗(yàn)箱溫度保持穩(wěn)定和數(shù)據(jù)記錄儀記錄數(shù)據(jù)時(shí)，切斷試驗(yàn)箱溫控裝置的電源。數(shù)據(jù)采集時(shí)間通常持續(xù)12h。此項(xiàng)試驗(yàn)提供在停電情況下試驗(yàn)箱保持在指定工作范圍內(nèi)時(shí)間長短的信息。此項(xiàng)試驗(yàn)獲得的數(shù)據(jù)可有助于確定停電后產(chǎn)品是否受到不利影響，以及制定停電情況下將產(chǎn)品轉(zhuǎn)移到其他試驗(yàn)箱/設(shè)施的作業(yè)流程。
以上問題許多都可以在過去的作業(yè)實(shí)踐、方案或標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序（SOP）中找到答案。
第2步——檢查設(shè)備與文檔
在實(shí)施《藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范》（GMP）的情況下，必須確保被用于執(zhí)行試驗(yàn)箱確認(rèn)的設(shè)備不僅適合作業(yè)，還必須處于良好工作狀態(tài)。這里涉及到兩個(gè)因素：
用于這一應(yīng)用的記錄儀是否已被驗(yàn)證？*好是設(shè)備制造商提供專門用途的IQ/OQ驗(yàn)證協(xié)議。
傳感器目前是否在校準(zhǔn)期內(nèi)？檢查校準(zhǔn)證書（也是由制造商提供）。驗(yàn)證軟件還應(yīng)顯示校準(zhǔn)日期信息，這些信息通常存儲(chǔ)在每臺(tái)設(shè)備的內(nèi)存中。如果使用熱電偶，前校準(zhǔn)和后校準(zhǔn)都必須進(jìn)行。對于校準(zhǔn)是溯源NIST(美國國家標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)研究院)的數(shù)據(jù)記錄儀，無需進(jìn)行前后校準(zhǔn)。
第3步——確認(rèn)設(shè)備運(yùn)行狀態(tài)
使用設(shè)備前檢查有無損壞。設(shè)施的標(biāo)準(zhǔn)操作程序應(yīng)含有這一檢查。如果沒有，有幾種方式可確保正常操作。例如，如果數(shù)據(jù)記錄儀存放在一起并準(zhǔn)備“打包”（連續(xù)“滑動(dòng)窗”方式讀取讀數(shù)），只需將數(shù)據(jù)記錄儀收集的信息轉(zhuǎn)移到PC機(jī)上，然后與不同數(shù)據(jù)記錄器的讀數(shù)比較。如果記錄器沒有存放在一起，還有一種方法可以確認(rèn)它們的功能，即將記錄儀并排短時(shí)間放在一起來比較讀數(shù)。為了降低使用任何未經(jīng)校準(zhǔn)的設(shè)備的風(fēng)險(xiǎn)，可采用幾種方式來檢查校準(zhǔn)情況。
測量讀數(shù)與正常值相差很大是出現(xiàn)問題的明顯跡象。如果環(huán)境保持穩(wěn)定，查看是否有化學(xué)污染影響了傳感器的測量結(jié)果?；蛘?，如果記錄儀中斷，斷路等物理損壞可能就是原因。對于讀數(shù)偏離原因不太明顯的情況，無需將記錄儀送到校準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室就可以進(jìn)行快速的精準(zhǔn)性檢查，即只需將記錄儀與其他經(jīng)過校準(zhǔn)的（可溯源NIST）數(shù)據(jù)記錄儀，或者溯源NIST的儀器進(jìn)行比對。*后，將任何可疑的記錄儀與認(rèn)可的參考標(biāo)準(zhǔn)（如冰浴或飽和鹽溶液環(huán)境）進(jìn)行比較，這是另外一種“健全檢查”。
第4步——設(shè)置數(shù)據(jù)記錄儀
在驗(yàn)證軟件中設(shè)置測試開始和停止時(shí)間、采樣時(shí)間間隔和記錄儀描述。
延遲開始時(shí)間，確保有充分的時(shí)間進(jìn)行設(shè)置和放置所有的數(shù)據(jù)記錄儀，并且在數(shù)據(jù)采集開始前使試驗(yàn)箱保持穩(wěn)定。
為所有數(shù)據(jù)記錄儀配置相同的開始和停止時(shí)間。開始/停止時(shí)間同步化將可以避免采集到無關(guān)數(shù)據(jù)。
設(shè)定一個(gè)適合應(yīng)用的采樣時(shí)間間隔，一個(gè)典型的“安全”采樣時(shí)間間隔可能是每分鐘1次。
為每臺(tái)數(shù)據(jù)記錄儀設(shè)置有一定含義的描述。例如，每臺(tái)數(shù)據(jù)記錄儀可以有一個(gè)ID編號(hào)，來描述其在試驗(yàn)箱中的位置。
第5步——放置數(shù)據(jù)記錄儀
按照驗(yàn)證方案、圖表或網(wǎng)格狀將傳感器放置在試驗(yàn)箱中?？梢詫υ囼?yàn)箱內(nèi)部進(jìn)行拍照，顯示出記錄儀和產(chǎn)品的位置。如果使用的是探頭式傳感器（而不是內(nèi)置傳感器的記錄儀），一定要確保它們在試驗(yàn)箱內(nèi)與任何表面沒有接觸。此外，還要在試驗(yàn)箱之外放置一臺(tái)數(shù)據(jù)記錄儀，以監(jiān)測室外溫度，或是室外溫度和相對濕度同時(shí)監(jiān)測，否則可能會(huì)造成結(jié)果無效，因?yàn)橥獠繙囟扔袝r(shí)會(huì)顯著影響內(nèi)部性能。外面的數(shù)據(jù)記錄儀需要遠(yuǎn)離容易受溫度影響的區(qū)域，如外墻、發(fā)熱設(shè)備、靠近窗戶或高流量的區(qū)域。
第6步——定期檢查進(jìn)度
*好定期檢查試驗(yàn)結(jié)果，確保分布試驗(yàn)按預(yù)定計(jì)劃進(jìn)行。例如，典型的驗(yàn)證方案可能需要驗(yàn)證技術(shù)人員，確定試驗(yàn)箱內(nèi)溫度何時(shí)穩(wěn)定，或是在試驗(yàn)過程中檢驗(yàn)運(yùn)行情況。使用“扁平電纜（flat cable）”可在不影響試驗(yàn)箱的情況下定期檢查一臺(tái)記錄儀的數(shù)據(jù)。
第7步——檢索和存儲(chǔ)數(shù)據(jù)
完成試驗(yàn)后，將數(shù)據(jù)從每臺(tái)數(shù)據(jù)記錄儀上傳輸?shù)絇C機(jī)上。定制文件名格式，方便查找文件，并與部署關(guān)聯(lián)起來。建議將軟件設(shè)置成自動(dòng)在文件名中包括以下信息：數(shù)據(jù)記錄儀的序列號(hào)、數(shù)據(jù)下載的時(shí)間和日期、數(shù)據(jù)記錄儀的用戶描述。大多數(shù)驗(yàn)證軟件都能提供防篡改的安全文件，以符合21 CFR（美國聯(lián)邦法規(guī)）第11部分中 FDA對電子記錄的要求。每個(gè)文件必須是唯壹標(biāo)識(shí)，使用戶能夠?qū)⒚糠荽蛴≥敵龅奈募c數(shù)據(jù)記錄儀中的原始文件對應(yīng)。
第8步——報(bào)告結(jié)果
可以采用幾種不同方式報(bào)告分布試驗(yàn)的結(jié)果：將所有數(shù)據(jù)記錄儀的文件可以繪制在一張圖表上，以顯示出試驗(yàn)箱不同部位的差別；或?qū)⑺凶x數(shù)和相關(guān)時(shí)間及日期的“原始數(shù)據(jù)”打印出來，以支持以上圖表；還可將數(shù)據(jù)導(dǎo)入Excel，便于以后的報(bào)告。
在報(bào)告中一定要明確數(shù)據(jù)記錄儀在每個(gè)位置記錄下的*高、*低和平均溫度。在某些情況下，將每個(gè)位置的平均動(dòng)態(tài)溫度包括進(jìn)來也很有價(jià)值，這個(gè)信息在確定試驗(yàn)箱中任何熱點(diǎn)或冷點(diǎn)時(shí)很有幫助，因?yàn)檫@些地方應(yīng)該放置連續(xù)監(jiān)測和報(bào)警傳感器。